蛋白质测定仪操作方法粗谈

更新时间：2010-08-17 点击次数：2413

蛋白质测定仪操作方法粗谈

蛋白质测定仪是用于测定粮食、食品、乳制品、饮料、饲料、土壤、水等物质中氮或者蛋白质含量的仪器，因为所测出的物质不仅含有蛋白质，同时还含有游离氨基酸、嘌呤、吡啶、尿素、硝酸盐和氨等物质，因此该仪器又被称为粗蛋白测定仪。

蛋白质测定仪包括两个装置：消化炉和蒸馏装置，分别用来消化样品以及蒸馏和滴定。浙江托普生产的蛋白质测定仪的消化炉有多种孔数选择，如4孔、8孔、12孔和20孔，根据消化炉不同孔数，我们可以将定氮仪分为不同的型号。如KDN-04A、KDN-08C等。下面我们具体介绍下蛋白质测定仪在测定蛋白质含量时的操作步骤。

消化：称取经粉碎的样品0.5克（视含氮量而定），放入已洗涤烘干的消化管中，加催化剂5克左右和10ml左右硫酸（如果是固体样品，在加浓硫酸前先加3ml左右的蒸馏水以湿润样品，以防止浓硫酸遇到强碱发生剧烈反应）。将消化管放入消化架的各个孔内，然后置于消化炉上，然后开启抽气三通上自来水，使抽气三通处于吸气状态，接通电源开始消煮。消化管有不同的孔数区别，你可以按照样品数的多少来选择。每两个消化炉孔共用一个进出水开关。

蒸馏：（1）打开电源，仪器自动进入加水状态，待加水工作完成后会自动停止。（2）在左边托盘放上空的消化管，右边放上空的三角瓶，打开水开关。为排空管路内空气，实验前请先按下加酸键，待液体流顺畅后停止加酸；加碱同样操作。按下蒸馏键，仪器开始进入蒸馏状态，待蒸气自动从喷射管中喷出并稳定后，关闭开关。在左边托盘放上已消化冷却好的样品，右边托盘放上250ml三角瓶，并使管口碰到杯底。再打开电源，依次按加酸、加碱、蒸馏键对样品进行蒸馏（加酸、加碱量设定自行）。蒸馏完毕后，将三角瓶下移，使接收管离开液面，用水冲洗出气口，继续蒸馏半分钟后，取下三角瓶待滴定用。第二个样品同上方法。（3）关开关，关水，取下消化管，打开侧面排水夹子，把连碱泵的胶管放入蒸馏水容器内，打开电源开关用手按加碱按键抽蒸馏水清洗碱泵，酸泵同样清洗，zui后关电结束。

滴定：用0.1 NHCL滴定接收瓶内的溶液，滴定至粉红色时为止，记下消耗HCL的毫升数，按下列式子计算蛋白含量：

蛋白质%＝

式中：X—样品中蛋白质的含量，%

V1—样品消耗硫酸或盐酸标准液的体积，ml；

V2—试剂空白消耗硫酸或盐酸标准液的体积，ml；

N—硫酸或盐酸标准溶液当量浓度；

0.014—1N硫酸或盐酸标准溶液1ml相当于氮克数；

m—样品的质量（体积），g（ml）；

F—蛋白质系数，按16%计算乘以6.25即为蛋白质。

（空白测定：用0.1克糖代替样品或不加样品作空白测定）